온라인 초임계유체추출초임계유체크로마토그래피-질량분석법을 이용한의약품 원료 및 제제에서N-nitrosodimethylamine 와N-nitrosodiethylamine 의 분석

출처: 픽사베이

온라인 초임계유체추출초임계유체크로마토그래피-질량분석법을 이용한의약품 원료 및 제제에서N-nitrosodimethylamine 와N-nitrosodiethylamine 의 분석

 

의약품 원료 및 완제의약품의 합성, 보관, 제제화 과정에서 오염 및 생성되는 N-nitrosodimethylamine (NDMA)와 N-nitrosodiethylamine (NDEA)은 강력한 발암의심물질 불순물이다. 본 연구에서는 의약품 중 극미량으로 존재하는 NDMA와 NDEA를 간편하고 정확하게 분석하기 위하여, 추출과 분리 및 검출이 자동화된 온라인 초임계유체추출(SFE)-초임계유체 크로마토그래피(SFC)-질량분석법을 개발하고 분석법 검증을 수행하였다. 독립 변수에 대한 예비시험을 바탕으로 실험 계획법(DoE)의 완전요인배치법과 반응표면분석법으로 초임계유체 추출 조건과 초임계 유체크로마토그래피의 분리 조건을 최적화하였고, ICH 2R(1A)의 가이드라인에 따라 특이성, 검량선 및 범위, 검출 한계 (LOD), 정량 한계 (LOQ), 정확성 및 정밀성 등의 항목에 대하여 분석법 검증을 수행하였다. 개발된 SFE-SFC-MS/MS 분석법으로 metformin, valsartan, ranitidine, nizatidine, tra-madol 등의 실제 의약품에 적용하여 미량의 NDMA와 NDEA를 분석하였다. 대상 의약품 중의 하나인 metformin의 경우, 식품의약품안전처 공인 분석법인 GC-MS/MS법과 비교하여 분석법의 타당성을 검토하였으며, 영국 LGC사의 NDMA숙련도 검체 맥아를 대상으로 본 분석법을 수행하여 NDMA 결과의 정확성을 확인하였다. 따라서 본 연구에서 개발한 온라인 초임계유체추출-초임계유체크로마토그래피-질량분석법은 NDMA와 NDEA 분석에 적용할 수 있는 완건성이 입증된 범용의 분석방법으로, 추후 다양한 의약품 원료 및 완제의약품 뿐만 아니라 일반식품을 비롯한 건강기능식품, 환경시료 등에도 적용할 수 있는 분석법으로 활용이 기대된다.

 

N-nitrosodimethylamine (NDMA) and N-nitrosodiethylamine (NDEA), which are contaminated and generated during the synthesis, storage, and formu-lation of drug substances and drug products, are strong carcinogenic impurities. In this study, we developed an automated online supercritical fluid extraction (SFE)-supercritical fluid chromatography (SFC)-tandem mass spectrometry (MS/MS) method for simple and accurate analysis of NDMA and NDEA, which exist in trace amounts of pharmaceuticals and the validation of analytical method was performed. Based on the preliminary tests for the independent var-iables of the analytical method, the conditions for extraction of supercritical fluid and separation conditions for supercritical fluid chromatography were op-timized using the full factorial design (FFD) and response surface methodology (RSM) of the Design of Experiment (DoE) method. In accordance with the guidelines of ICH 2R(1A), analytical method validation was performed for items such as specificity, calibration curve and range, limit of detection (LOD), limit of quantitation (LOQ), accuracy and precision.

Analysis methods such as specificity, calibration curve and range, limit of detection (LOD), limit of quantitation (LOQ), accuracy and precision were per-formed according to the guidelines of ICH 2R(1A). The developed SFE-SFC-MS/MS analytical method was applied to actual medicines such as metformin, valsartan, ranitidine, nizatidine, and tramadol to analyze trace amounts of NDMA and NDEA. In the case of metformin, one of the target drugs, the valid-ity of the analytical method was confirmed by comparing it with the GC-MS/MS method, an analytical method approved by the Ministry of Food and Drug Safety (MFDS). In addition, this analysis was performed on malt, an NDMA proficiency sample of LGC in the UK, to confirm the accuracy of the NDMA results. Therefore, the online supercritical fluid extraction-supercritical fluid chromatography-tandem mass spectrometry method developed in this study is a universal analytical method for NDMA and NDEA that has proven robustness. In the future, it is expected to be used as an analysis method appli-cable to general food, health functional food, and environmental samples.

 

출처: http://www.riss.kr/search/detail/DetailView.do?p_mat_type=be54d9b8bc7cdb09&control_no=1a9ab3d03278a699ffe0bdc3ef48d419&keyword=%EC%B4%88%EC%9E%84%EA%B3%84

 

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